ストーリーは、アンドリュー・ガーフィールド扮する主人公の高校生“ピーター・パーカー”がモンスター化した“カート・コナーズ博士”と戦うという内容。主人公はオズコープ社の研究所を見学した際、遺伝子操作実験対象の蜘蛛に刺されてしまう。主人公はその蜘蛛により特殊な力を得て、スパイダーマンとして活躍し始める。